慧聪网首页 > 农林牧副渔行业 > 行业标准
出口水果中赤霉素残留量检验方法
 
慧聪网   2005年4月18日9时48分      

    1 主题内容与适用范围

    本标准规定了出口水果中赤霉素残留量检验的抽样、制样和荧光分光光度测定方法。
    本标准适用于出口柑桔中赤霉素残留量的检验。

    2 抽样和制样

    2.1 检验批
    以不超过1 500件为一检验批。
    同一检验批的商品应具有相同的特征,如包装、标记、产地、规格和等级等。
    2.2 抽样数量
    批量,件      最低抽样数,件
    1~25             1
    26~100           5
    101~250          10
    251~1 500        15
    2.3 抽样方法
    按2.2规定的抽样件数随机抽取,逐件开启。每件至少取500g。作为原始样品,原始样品总量不得少于2kg。加封后,标明标记,及时送实验室。
    2.4 试样制备
    将所取混合原始样品缩分出1kg,取可食部分,经组织捣碎机捣碎,均分成两份,装入洁净容器内,作为试样。密封,并标明标记。
    2.5 试样保存
    将试样于-18℃以下冷冻保存。
    注:在抽样和制样的操作过程中,必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。

    3 测定方法

    3.1 方法提要
    以丙酮提取样品中赤霉素,然后用乙酸乙酯提取,再用缓冲溶液反提取后,在薄层层析板上除去干扰物质,最后用荧光分光光度法测定。
    3.2 试剂和材料
    3.2.1 丙酮:分析纯。
    3.2.2 乙酸乙酯:分析纯。
    3.2.3 硫酸:优级纯。
    3.2.4 硫酸溶液:50%(V/V)。
    3.2.5 乙醇:分析纯。
    3.2.6 甲醇:分析纯。
    3.2.7 缓冲溶液(pH7):溶解6.7g分析纯磷酸二氢钾和1.2g分析纯氢氧化钠在1 000mL蒸馏水中。
    3.2.8 展开剂:氯仿-乙酸乙酯-冰乙酸(10+4+1.6)。
    3.2.9 乙醇-硫酸溶液:(9+1)。
    3.2.10 硫酸溶液:85%(V/V),将85mL硫酸缓慢加入15mL蒸馏水中。
    3.2.11 硅胶G:薄层层析用。
    3.2.12 赤霉素标准品:纯度≥95%。
    3.2.13 赤霉素标准溶液:准确称取适量的赤霉素标准品,用甲醇配成浓度1.00mg/mL的标准储备溶液,根据需要再配成适当浓度的标准工作溶液。
    3.3 仪器和设备
    3.3.1 荧光分光光度计:备有10mm石英池。
    3.3.2 锥形瓶:具磨口塞,500mL。
    3.3.3 组织捣碎机。
    3.3.4 布氏漏斗。
    3.3.5 振荡机
    3.3.6 圆底烧瓶:1 000mL。
    3.3.7 酸度计。
    3.3.8 旋转蒸发器。
    3.3.9 分液漏斗:250mL。
    3.3.10 涡旋混合器。
    3.3.11 离心管:具磨口塞,5mL、10mL。
    3.3.12 紫外灯:发射波长365nm。
    3.3.13 硅胶薄层板的涂布:在20cm×20cm玻璃层析板上将硅胶G(硅胶-水=1+3)涂布成0.3mm的薄层板,自然干燥30min。于110℃烘箱中活化1h,冷却后放置干燥器中备用。
    3.3.14 微量注射器:25μL。
    3.4 测定步骤
    3.4.1 提取
    称取试样100g(精确到0.1g)于锥形瓶内,加20mL蒸馏水和125mL丙酮,振荡30min。混合物经布氏漏斗抽滤;试样和残渣放回锥形瓶中,再用125mL丙酮重复振荡15min,再以铺有新滤纸的布氏漏斗抽滤。用50mL丙酮洗涤锥形瓶并倒在滤渣上,抽滤,再用100mL丙酮洗涤残渣并过滤。
    3.4.2 净化
    将丙酮-水提取液收集于1 000mL圆底烧瓶中,在30℃水浴上,用旋转蒸发器减压蒸发至丙酮完全除去。剩下的试样水溶液用折叠滤纸过滤,用50mL蒸馏水洗涤烧瓶并通过同一滤器过滤,再用2×10mL蒸馏水洗涤滤纸。将滤液转入烧杯中,滴加50%的硫酸溶液,调至pH为2.5±0.2。将样液定量转入250mL分液漏斗中,以少量蒸馏水洗涤烧杯。然后用3×50mL乙酸乙酯提取,收集乙酸乙酯提取液于第二个分液漏斗中。再用3×50mLpH7的缓冲溶液提取。弃去乙酸乙酯相。收集缓冲溶液提取液于250mL烧杯中,用50%的硫酸溶液调至pH2.5±0.2,再将溶液转入第三个250mL分液漏斗中,用3×50mL乙酸乙酯提取。
    收集乙酸乙酯相,并通过折叠滤纸滤入250mL圆底烧瓶中,于30℃水浴中旋转蒸发至干。准确加入1.0mL乙酸乙酯以溶解残留物。立即转入5mL离心管,冰浴冷却5min,以2500r/min离心5min。
    3.4.3 薄层分离
    在制备好的硅胶薄层板上,离底部2cm的线上分别点加25μL样液和10μL赤霉素标准溶液(10μL/mL)。自然干燥后放入装有新配制的氯仿-乙酸乙酯-冰乙酸(10+4+1.6)展开剂的密闭槽内,让展开剂上行展开15cm取出。自然干燥后,用玻璃板遮住薄层展开后的样品部分,用乙醇-硫酸(9+1)溶液喷撒薄层展开后的标准样品部位,于100℃烘箱中加热10min。冷却后,在暗室的紫外灯(发射波长365nm)下观察,以此来对照标出样品部分相应的赤霉素组分区。将样品的赤霉素组分区域刮下,转入10mL离心管中,加1mL蒸馏水,混合、溶解,置冰浴中冷却5min。同时吸取2.0mL标准溶液(含赤霉素2μg)到第二个试管中,冰浴冷却5min,在每个试管中加入5mL已冷却的85%硫酸,继续在冰浴中冷却10min。取出试管,室温静置1h。供荧光分光光度法测定。
    3.4.4 测定
    3.4.4.1 荧光条件
    a. 激发波长:416nm。
    b. 发射波长:462nm。
    3.4.4.2 荧光测定
    分别将新制备的样品溶液和标准溶液装入清洁的石英池中,依次放入仪器内,测定每个溶液的荧光强度。
    3.4.5 空白试验
    除不加样品外,按上述测定步骤进行。
    3.4.6 结果计算和表述
    按下式计算:
             E·c·V
          X=────
              Es·m
    式中:X——试样中赤霉素残留量,mg/kg;
          E——样液中赤霉素的荧光强度;
          Es——标准工作溶液中赤霉素的荧光强度;
          c——标准工作溶液中赤霉素的浓度,μg/mL;
          V——样液最终定容体积;
          m——最终样液中所代表的试样量,g。
    注:计算结果需扣除空白值。

    4 方法的测定低限、回收率

    4.1 测定低限:
    本方法测定低限为0.03mg/kg。
    4.2 回收率
    回收率的实验数据:赤霉素添加浓度在0.03~0.2mg/kg范围内,回收率为87.7%~94.3%。
 
 
评论    【推荐】 【打印】 【论坛
 
 
[热门关键词]:水果 
特别推荐:
·国内棕油现货市场价格早报(4.12)
·东北地区大豆收购价格(4.12)
更多精彩:
·日本海藻糖即将获准进入我国市场
·欧盟考虑暂停进口美国玉米蛋白饲料
 相关文章 更多 
·红茶、绿茶、花茶运输包装标准(上)  (4.13 14:37)
·农业用氯化铵质量标准GB2946-1992  (4.13 14:35)
·农业用碳酸氢铵新标准GB3559-2001  (4.13 14:35)
·出口粮谷中对硫磷残留量检验方法  (3.28 16:25)
·玉米无公害标准化生产技术规程  (3.28 16:25)
·工业玉米淀粉国家标准  (3.28 16:25)
·赤豆、绿豆种子国家标准  (3.28 16:25)
·食品中脱氢乙酸的测定方法  (3.28 16:25)
·食品中丙酸钠和丙酸钙的测定方法  (3.28 16:25)
·农业国家标准-饲料(GB82)  (3.28 16:25)
 我来评两句〖查看最新评论〗 
请您注意:
·遵守中华人民共和国的各项有关法律法规
·承担一切因您的行为而导致的法律责任
·本网留言板管理人员有权删除其管辖留言内容
·您在本网的留言,本网有权在网站内转载或引用
·参与本留言即表明您已经阅读并接受上述条款
昵称:匿名
 
分类广告  
产品超市
·求购大豆、绿豆、玉..
·求购大米绿豆等生活..
·求购小麦大麦玉米高..
·求购高粱
·供应植物机能促进剂..
·供应屠宰机械、屠宰..
·供应立式大包机 HDF..
热点专题
·禽流感疫情袭卷全球
·冬季的养生与保健
·无公害不是“免死金牌”
·绿色食品儿童的健康伴侣
·我国花卉产业面面观
·农用机械俏金秋
·中秋庆团圆 礼好情更浓
行业书店